Ocena trzech dostępnych na rynku zestawów ELISA do oznaczania chromograniny A

Chromogranina A (CgA) jest obecnie najcenniejszym biomarkerem guza do diagnostyki, leczenia i obserwacji guzów neuroendokrynnych (NET). Celem naszego badania było porównanie trzech różnych dostępnych na rynku zestawów CgA ELISA oraz ocena ich wydajności analitycznej i klinicznej. CgA mierzono trzema różnymi komercyjnymi zestawami ELISA na surowicach resztkowych od 40 pacjentów: test Chromoa R (Cis), ELISA Hu chromograniny A (Dia) i Neolisa chromogranina A (Euro). Wydajność analityczną i kliniczną oceniano, mierząc precyzję, obszar pod krzywą ROC, czułość, swoistość, dodatnią i ujemną wartość predykcyjną, współczynniki korelacji oraz analizy regresji Passinga i Babloka.

Precyzja (CV%) była akceptowalna dla wszystkich ocenianych testów ELISA (Cis 10,3%; Dia 9,8%; Euro 14,5%). Pole pod krzywą (AUC) było porównywalne między trzema testami (Cis 0,693; Dia 0,627; Euro 0,721). Czułość wahała się od 41,2% do 64,7%. Swoistość wahała się od 69,6% do 82,6% . Porównanie parami ujawniło istotne systematyczne i proporcjonalne różnice przy porównywaniu Cis vs Dia (Cis = 25,30 + 1,94 Dia) i Euro vs Dia (Euro = 26,54 + 1,92 Dia).

Wydajność analityczna i kliniczna była porównywalna dla trzech testów ELISA. Wyniki CgA uzyskane z różnymi testami ELISA nie są zamienne. Skróty CgA: Chromogranina A; ELISA: test immunoenzymatyczny; IRMA: Test immunoradiometryczny; NET: guzy neuroendokrynne; PPI: Inhibitory pompy protonowej; RIA: test radioimmunologiczny.

Porównanie międzylaboratoryjne 2 zestawów ELISA stosowanych do serologii białek niestrukturalnych wirusa pryszczycy

Testy serologiczne stosowane do wykrywania przeciwciał przeciwko niestrukturalnym białkom (NSP) wirusa pryszczycy (FMDV) są stosowane do nadzoru choroby w krajach endemicznych i są niezbędne do dostarczenia dowodów na brak choroby ze szczepieniami lub bez oraz do wyzdrowienia wolny status kraju po wybuchu epidemii. W 5-ośrodkowym badaniu międzylaboratoryjnym porównaliśmy wydajność 2 komercyjnych zestawów NSP ELISA (protokoły ID Screen FMD NSP ELISA jednodniowe [krótkie] i nocne, ID.Vet; PrioCHECK FMDV NS przeciwciało ELISA, Thermo Fisher Scientific).

Ogólna zgodność między testem PrioCHECK a testem ID Screen wyniosła 93,8% (95% CI: 92,0-95,2%) i 94,8% (95% CI: 93,1-96,1%) odpowiednio dla protokołów nocnej i krótkiej inkubacji ID Screen. Nasze wyniki wskazują, że testy (w tym 2 różne formaty testu ID Screen) mogą być stosowane zamiennie w nadzorze serologicznym po epidemii.

Porównanie komercyjnych zestawów ELISA w celu potwierdzenia braku transmisji w ustawieniach eliminacji malarii

Pomiary przeciwciał przeciwmalarycznych są przydatne, ponieważ odzwierciedlają historyczną i niedawną ekspozycję na malarię. W związku z tym mogą dostarczać dodatkowych informacji w celu oceny trwającego przenoszenia w warunkach o niskiej endemii lub przed eliminacją, gdzie przypadki są rzadkie. Ponadto brak odpowiedzi przeciwciał u niektórych osobników może wskazywać na zaprzestanie transmisji. Komercyjne testy immunoenzymatyczne wiązania malarii (ELISA) wykrywają przeciwciała przeciwmalaryczne i są powszechnie stosowane do badania przesiewowych dawców krwi pod kątem możliwej infekcji malarią. Nie ma jednak znormalizowanego testu wykrywającego przeciwciała przeciwmalaryczne do użytku epidemiologicznego. Tutaj porównaliśmy pięć dostępnych na rynku zestawów ELISA (Trinity Biotech, newbio, DiaPro, Cellabs i NovaTec) w poszukiwaniu znormalizowanego narzędzia do potwierdzania twierdzeń o braku przenoszenia malarii. Dla porownania,

Komercyjne zestawy zostały najpierw porównane przy użyciu próbek surowicy od znanych osób nienarażonych na malarię ( n = 223) i osób zakażonych Toxoplasma ( n = 191) w celu oceny swoistości i reaktywności krzyżowej przeciwko infekcjom innym niż malaria. Ponadto do oceny wrażliwości wykorzystano 134 próbki od dzieci w wieku ≥10 lat zebrane w regionie hiperendemicznym w Gambii na początku lat 90. XX wieku. Trzy z pięciu zestawów wykazały wysoką czułość (90-92%), wysoką swoistość (98-99%), niską reaktywność krzyżową (0-3%) i zostały uznane za przyjazne dla użytkownika (Trinity Biotech, newbio i NovaTec).

Dwa z tych zestawów (Trinity Biotech i NovaTec) przekazano do oceny epidemiologicznej, a wyniki porównano z wynikami testu RB-ELISA. Zbadano próbki z dwóch środowisk wstępnej eliminacji (Praia, Republika Zielonego Przylądka; n = 1396 i Bataan, Filipiny; n = 1824). Wyniki serologiczne z zestawu Trinity Biotech i RB-ELISA były zgodne z ostatnio wykrytymi pasywnie liczbą przypadków w obu ustawieniach. Wyniki z zestawu Trinity Biotech odzwierciedlały znaczny spadek liczby zgłoszonych przypadków w Bataan w latach 90. lepiej niż RB-ELISA. Wyniki z zestawu NovaTec nie odzwierciedlały wzorców transmisji w żadnym z ustawień.

Komercyjny zestaw ELISA Trinity Biotech został uznany za wiarygodny do użytku epidemiologicznego i dokładnie opisany wzorce przenoszenia w dwóch (wcześniej) endemicznych warunkach malarii. Zastosowanie tego prostego i znormalizowanego narzędzia serologicznego może wspomóc krajowe programy kontroli i eliminacji, potwierdzając, że regiony są wolne od malarii.

Ocena porównawcza czterech dostępnych na rynku zestawów ELISA do pomiaru przeciwciał przeciwko adalimumabowi i przeciw adalimumabowi

W leczeniu chorób autoimmunologicznych coraz częściej stosuje się terapeutyczne monitorowanie leków inhibitorów czynnika martwicy nowotworu, takich jak adalimumab. Mogą jednak występować znaczne różnice w stężeniach leków i przeciwciał uzyskanych różnymi metodami testowymi. Celem tego badania było porównanie wydajności czterech zestawów ELISA do pomiaru przeciwciał adalimumabu i przeciw adalimumabowi.

Rozcieńczenia surowic wzbogaconych adalimumabem lub antyadalimumabem oceniano pod kątem odzysku i precyzji przy użyciu następujących czterech zestawów: LISA-Tracker (Theradiag, Croissy-Beaubourg, Francja), Promonitor (Grifols, Barcelona, Hiszpania), Ridascreen (R-Biopharm, Darmstadt, Niemcy) i Shikari (Matriks Biotek, Gölbasi/Ankara, Turcja). Oceniono również próbki interferencyjne.

W stężeniu terapeutycznym wykrywalność adalimumabu była porównywalna w czterech zestawach ELISA. Zestawy Lisa-Tracker i Shikari dawały fałszywie dodatnie wyniki niskiego zakresu w normalnych surowicach. Infliksymab i etanercept powodowały fałszywie dodatnie wyniki w zestawach Lisa-Tracker i Shikari. Zestawy ELISA przeciwciał przeciwko adalimumabowi różniły się działaniem z próbkami wzbogaconymi ze względu na różne jednostki miary i zakresy. Zestawy Ridascreen i Shikari były zależne od dawki na całej krzywej standardowej i dobrze ze sobą korelowały (r = 0,997). Reakcja krzyżowa była obserwowana w surowicach z dodatnim wynikiem czynnika reumatoidalnego testowanych na zestawie Promonitor anty-adalimumab.

Wszystkie testowane zestawy adalimumabu były zależne od dawki w zakresie terapeutycznym i dobrze korelowały. Znaczenie obserwowanych wyników fałszywie dodatnich o niskim zakresie i reaktywności krzyżowej z infliksymabem w zestawach LISA-Tracker i Shikari zależy od wskazań otrzymanych do badania w laboratorium. Zestawy anty-adalimumab ELISA dały różne wyniki dla wzbogaconych surowic; jednak wykazali się dobrą precyzją. Zmienność między zestawami sugerowała, że poziomy antyadalimumabu należy porównywać tylko przy użyciu tej samej metody.

Ocena trzech zestawów ELISA do badań przesiewowych pozostałości kolistyny w mięśniach wieprzowych i drobiowych zgodnie z europejskimi wytycznymi dotyczącymi walidacji metod przesiewowych

Kolistyna jest antybiotykiem polipeptydowym stosowanym głównie u świń i drobiu w leczeniu infekcji żołądkowo-jelitowych. Została wpisana przez Światową Organizację Zdrowia (WHO) na listę antybiotyków o krytycznym znaczeniu dla ludzi o wysokim priorytecie dla oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe. Dlatego konieczne jest opracowanie specyficznych i czułych metod badań przesiewowych dla tej cząsteczki. Badanie przesiewowe kolistyny za pomocą testów immunologicznych jest interesującą alternatywą dla metod przesiewowych LC-MS/MS.

Kanamycin ELISA Kit
DEIA048	Creative Diagnostics	96T	1138 EUR
Kanamycin ELISA Kit
K4210-100	Biovision		865 EUR
Kanamycin ELISA Kit
55R-2240	Fitzgerald	1 kit	698 EUR
Kanamycin
CA004-010	GenDepot	10g	158 EUR
Kanamycin
CA004-025	GenDepot	25g	246 EUR
Kanamycin
abx081003-1ml	Abbexa	1 ml	398 EUR
Kanamycin (sulfate)
HY-16566A	MedChemExpress	200mg	108 EUR
Kanamycin [HRP]
DAG1208	Creative Diagnostics	0.5ml	1105 EUR
Kanamycin [BSA]
DAGA-040B	Creative Diagnostics	1mg	715 EUR
Kanamycin [KLH]
DAGA-044K	Creative Diagnostics	1mg	975 EUR
Kanamycin B
GP2512-1G	Glentham Life Sciences	1 g	106 EUR
Kanamycin B
GP2512-250MG	Glentham Life Sciences	250 mg	62 EUR
Kanamycin B
GP2512-500MG	Glentham Life Sciences	500 mg	78 EUR
Kanamycin B
GP2512-5G	Glentham Life Sciences	5 g	309 EUR
Kanamycin(KM)
AT021	Unibiotest	1mg	945 EUR
Kanamycin(KM)
AG021	Unibiotest	1 mg	523 EUR
Kanamycin Sulfate
20-abx082577	Abbexa	175.00 EUR 217.00 EUR	1 g 5 g
Kanamycin Antibody
20-abx210190	Abbexa	439.00 EUR 328.00 EUR	100 ug 50 ug
Kanamycin A
C3795-10000	ApexBio	10 g	226 EUR
Kanamycin A
C3795-25000	ApexBio	25 g	329 EUR
Kanamycin A
C3795-5000	ApexBio	5 g	163 EUR
Kanamycin Sulfate
A2516-10000	ApexBio	10 g	351 EUR
Kanamycin Sulfate
A2516-5.1	ApexBio	10 mM (in 1mL H2O)	108 EUR
Kanamycin Sulfate
A2516-50000	ApexBio	50 g	630 EUR
Kanamycin antibody
10-1545	Fitzgerald	100 ug	392 EUR
Kanamycin antibody
20-1183	Fitzgerald	100 ul	879 EUR
Kanamycin-BSA
80-1467	Fitzgerald	1 mg	651 EUR
Kanamycin-OVA
80-1468	Fitzgerald	1 mg	651 EUR
Kanamycin-HRP
80-1187	Fitzgerald	500 ul	137 EUR
Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1	Alpha Diagnostics	1	202 EUR
Kanamycin Sulfate, 100g
R2538-100g	ACTGene		471 EUR
Kanamycin Sulfate, 25g
R2538-25g	ACTGene		190 EUR
Kanamycin Sulfate USP
K008-25G	TOKU-E	25 g	164 EUR
Kanamycin Sulfate USP
K008-5G	TOKU-E	5 g	80 EUR
Kanamycin monosulfate salt
GA0531-100G	Glentham Life Sciences	100 g	158 EUR
Kanamycin monosulfate salt
GA0531-25G	Glentham Life Sciences	25 g	78 EUR
Kanamycin monosulfate salt
GA0531-5G	Glentham Life Sciences	5 g	50 EUR
Kanamycin disulfate salt
GA8523-1G	Glentham Life Sciences	1 g	62 EUR
Kanamycin disulfate salt
GA8523-25G	Glentham Life Sciences	25 g	341 EUR
Kanamycin disulfate salt
GA8523-5G	Glentham Life Sciences	5 g	108 EUR
pUC57- Kanamycin Plasmid
PVT0007	Lifescience Market	2 ug	273 EUR
pDONR221/ Kanamycin Plasmid
PVT3100	Lifescience Market	2 ug	266 EUR
pBARGPE1- Kanamycin Plasmid
PVT5304	Lifescience Market	2 ug	325 EUR
Kanamycin Sulfate, USP
2498-25G	Biovision		566 EUR
Kanamycin Sulfate, USP
2498-5G	Biovision		218 EUR
Kanamycin monoclonal antibody
10R-11496	Fitzgerald	1 mg	1110 EUR
Kanamycin Acid Sulfate BP
K004-25G	TOKU-E	25 g	251 EUR
Kanamycin Acid Sulfate BP
K004-5G	TOKU-E	5 g	82 EUR
Kanamycin Acid Sulfate EW
K029-25G	TOKU-E	25 g	248 EUR
Kanamycin Acid Sulfate EW
K029-5G	TOKU-E	5 g	83 EUR
Kanamycin monosulfate salt, EP
GA9089-100G	Glentham Life Sciences	100 g	174 EUR
Kanamycin monosulfate salt, EP
GA9089-25G	Glentham Life Sciences	25 g	86 EUR
Kanamycin monosulfate salt, EP
GA9089-50G	Glentham Life Sciences	50 g	118 EUR
Kanamycin monosulfate salt, EP
GA9089-5G	Glentham Life Sciences	5 g	54 EUR
Kanamycin solution (50mg/ml)
MN800A-1	SBI	20 ml	127 EUR
pQE- 80L- Kanamycin Plasmid
PVT0535	Lifescience Market	2 ug	325 EUR
pQE- 81L- Kanamycin Plasmid
PVT0537	Lifescience Market	2 ug	325 EUR
pQE- 82L- Kanamycin Plasmid
PVT0539	Lifescience Market	2 ug	325 EUR
Frit Kit
FRIT-KIT	Next Advance	1each	124 EUR
Kanamycin Acid Sulfate for BioProcessing
K012-25G	TOKU-E	25 g	379 EUR
Kanamycin Acid Sulfate for BioProcessing
K012-5G	TOKU-E	5 g	114 EUR
Kanamycin A Sulfate EvoPure®
K013-100MG	TOKU-E	100mg	284 EUR
Kanamycin B Sulfate EvoPure®
K014-100MG	TOKU-E	100mg	115 EUR
5 G KANAMYCIN SULFATE, POWDER
61-176-RG	CORNING	5 g/pk	85 EUR
Column Packing Kit
PACK-KIT	Next Advance	1pack	1035 EUR
PCR Mycoplasma Detection Kit
M034-Kit	TOKU-E	Kit	266 EUR
Cas9 Protein and T7 gRNA SmartNuclease Synthesis Kit
CAS400A-KIT	SBI	1 kit (10 rxn)	1110 EUR
Kanamycin B (K8), RNA Aptamer, unlabeled
AR-245-U	Alpha Diagnostics	Custom	Ask for price
Kanamycin kinase type II Recombinant Protein
92-658	ProSci	0.05 mg	542.75 EUR
CMV-hspCas9-T2A-Puro SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV100PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
CMV-hspCas9-EF1-GFP SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV105PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
MSCV-hspCas9-T2A-Puro SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV120PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
MSCV-hspCas9-EF1-GFP SmartNuclease Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV125PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + EF1-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector
CAS700A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + CAG-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector
CAS720A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + CMV-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector
CAS740A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
T7 gRNA SmartNuclease Synthesis Kit (includes CAS510A-1 & T7 IVT synthesis reagents)
CAS510A-KIT	SBI	1 Kit	805 EUR
Cas9 Nickase: CMV-hspCas9(D10A)-T2A-Puro SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV200PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
Cas9 Nickase: CMV-hspCas9(D10A)-EF1-GFP SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV205PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
Cas9 Nickase: MSCV-hspCas9(D10A)-T2A-Puro SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV220PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
Cas9 Nickase: MSCV-hspCas9(D10A)-EF1-GFP SmartNickase Lentivector Plasmid + LentiStarter Packaging Kit
CASLV225PA-KIT	SBI	1 Kit	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: EF1-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector
CAS750A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: CAG-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector
CAS770A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
Multiplex gRNA Kit + Cas9 Nickase: CMV-T7-hspCas9-nickase-H1-gRNA linearized SmartNickase vector
CAS790A-KIT	SBI	10 rxn	1132 EUR
Cas9 SmartNuclease Extra Ligation Kit [includes 5x ligation buffer (10 ul) and Fast ligase (2.5ul)]
CAS9LIG-KIT	SBI	1 Kit	153 EUR
PinPoint-FC 293T Platform Kit for Targeted Gene Insertion (includes PIN320A-1, PIN200A-1, PIN510A-1 & PIN600A-1)
PIN320A-KIT	SBI	1 Kit	4941 EUR
PinPoint-FC Murine iPSC Platform Kit for Targeted Gene Insertion (includes PIN340iPS-1, PIN200A-1, PIN510A-1 & PIN600A-1)
PIN340iPS-KIT	SBI	1 Kit	4941 EUR
Kanamycin A (sla 16), RNA Aptamer, unlabeled
AR-244-U	Alpha Diagnostics	Custom	Ask for price
AAVS1 Safe Harbor Targeting Vector 2.0 - All-Purpose Donor (AAVS1-SA-puro-MCS), Complete Kit with CAS601A-1 (Cas9 SmartNuclease AAVS1-gRNA Targeting Vector) and GE640PR-1 (Junction PCR Primer Mix to confirm AAVS1 integration site)
GE620A-KIT	SBI	1 kit	2132 EUR
AAVS1 Safe Harbor Targeting Vector 2.0 - GOI Knock-in Donor (AAVS1-SA-puro-EF1-MCS), Complete Kit with CAS601A-1 (Cas9 SmartNuclease AAVS1-gRNA Targeting Vector) and GE640PR-1 (Junction PCR Primer Mix to confirm AAVS1 integration site)
GE622A-KIT	SBI	1 kit	2132 EUR
AAVS1 Safe Harbor Targeting Vector 2.0 - Reporter Knock-in Donor (AAVS1-SA-puro-MCS-GFP), Complete Kit with CAS601A-1 (Cas9 SmartNuclease AAVS1-gRNA Targeting Vector) and GE640PR-1 (Junction PCR Primer Mix to confirm AAVS1 integration site)
GE624A-KIT	SBI	1 kit	2132 EUR
vWF Acty. Kit
ABP-ACT-KIT	Abpcorp	12 x 8 microwells	428 EUR
vWF Ant. Kit
ABP-TOT-KIT	Abpcorp	12 x 8 microwells	394 EUR
Anti-Kanamycin antibody Mouse anti-human, monoclonal IgG1
V100265	AAT Bioquest	50 ug	306 EUR
Anti-Kanamycin antibody Mouse anti-human, monoclonal IgG1
V100266	AAT Bioquest	1 mg	1089 EUR
Recombinant Klebsiella pneumoniae Kanamycin kinase type II/NEO
CM66-10ug	Novoprotein	10ug	156 EUR
Recombinant Klebsiella pneumoniae Kanamycin kinase type II/NEO
CM66-1mg	Novoprotein	1mg	2283 EUR
Recombinant Klebsiella pneumoniae Kanamycin kinase type II/NEO
CM66-500ug	Novoprotein	500ug	1613 EUR
Recombinant Klebsiella pneumoniae Kanamycin kinase type II/NEO
CM66-50ug	Novoprotein	50ug	369 EUR
hspCas9 AAVS1 Safe Harbor Knock-in Donor (AAVS1-SA-puro-EF1-hspCas9)
CAS620A-KIT	SBI	1 kit	2152 EUR

Skuteczność trzech dostępnych na rynku zestawów ELISA oceniano w mięśniach drobiu i świń pod kątem wykrywania kolistyny w odniesieniu do jej europejskiego maksymalnego limitu pozostałości (MRL) (150 µg/kg). Wykazano przydatność trzech zestawów ELISA do wykrywania kolistyny na poziomie lub poniżej MRL w mięśniach świń i drobiu. Zdolności wykrywania (CCβ) dwóch zestawów były lub mniejsze lub równe MRL (150 µg/kg). Najniższą zdolność wykrywania (30 µg/kg) osiągnięto za pomocą trzeciego zestawu ELISA. Swoistość trzech zestawów była bardzo zadowalająca (wskaźniki wyników fałszywie dodatnich 0%). Te trzy zestawy są bardzo specyficzne do wykrywania kolistyny (kolistyny A i B) oraz polimyksyny B.