Ilościowe badanie Golgiego nad morfologią dendrytyczną w średnich neuronach kolczastych prążkowia myszy.

W tym badaniu przedstawiliśmy szczegółową ilościową analizę morfologiczną średnich neuronów kolczastych (MSN) w prążkowiu grzbietowym myszy i określiliśmy zgodność wartości pomiędzy trzema grupami zwierząt uzyskanych w różnych zestawach eksperymentów. Drzewa dendrytyczne 162 aparatów Golgi Cox ( zestaw FD Rapid GolgiStain Kit ) impregnowanych MSN od 15 dorosłych myszy C57BL/6 zrekonstruowano trójwymiarowo za pomocą oprogramowania Neurolucida, a parametry morfologii dendrytycznej porównano między grupami doświadczalnymi. Parametry długości i wzoru rozgałęzień nie wykazywały statystycznie istotnej różnicy i były wysoce spójne między grupami.

Średnia powierzchnia neuronalnej somy wynosiła od 160 μm2 do 180 μm2, a komórki miały 5-6 pierwotnych dendrytów z blisko 40 segmentami na neuron. Analiza Sholla potwierdziła regularność rozgałęzień dendrytycznych. Całkowita długość dendrytów wynosiła około 2100 µm, przy średniej długości poszczególnych odgałęzień (pośrednich) około 22 µm, a końcowej około 100 µm. Mimo że każda grupa eksperymentalna przeszła ten sam, ściśle określony protokół w zakresie preparacji tkanek i barwienia aparatu Golgiego, stwierdziliśmy niespójność objętości dendrytów i powierzchni somy.

Na te zmiany można było wpłynąć metodologicznie podczas procedury Golgiego, chociaż bez wpływu na długość dendrytów i złożoność drzewa. Ponieważ aktywność neuronalna wpływa na grubość dendrytów, nie można było wykluczyć, że obserwowana niespójność objętości była związana ze stanami funkcjonalnymi neuronów przed uśmierceniem zwierząt. Dostarczone tutaj kompleksowe analizy złożoności drzew i długości dendrytów mogą posłużyć jako dodatkowe narzędzie do zrozumienia zmienności morfologicznej w najliczniejszej populacji neuronów prążkowia. Jako wartości odniesienia mogą stanowić podstawę do porównań z wynikami uzyskanymi w badaniach, w których do wyjaśniania różnych stanów patologicznych, w których występują MSN, wykorzystuje się różne modele genetycznie zmodyfikowanych myszy.

Ustalenie zoptymalizowanego protokołu dla metody mikroskopii elektronowej Golgiego w oparciu o procedurę barwienia Golgiego-Coxa przy użyciu komercyjnego zestawu .

Wprowadzenie zestawu FD Rapid GolgiStain Kit umożliwiło wielu badaczom łatwe badanie morfologii neuronów. Dzięki ulepszonej metodzie impregnacji Golgi-Cox, przy użyciu tego zestawu można uzyskać zarówno stabilne, jak i bardzo czułe barwione obrazy neuronów . Aby szczegółowo przeanalizować mikrostruktury, takie jak kolce dendrytyczne i stożki wzrostu, staraliśmy się stworzyć użyteczną metodę łączącą barwienie Golgiego-Coxa i mikroskopię elektronową (metoda Golgiego-EM), tak aby przygotowane próbki barwione Kit były odpowiednie do zastosowania w mikroskopii elektronowej (EM) badania.

Wyniki niniejszego badania sugerują znaczenie etapu wiązania aldehydem glutarowym w metodzie Golgiego-EM. Tutaj przedstawiamy zalecany protokół dla metody Golgiego-EM, który jest dostępny dla ultrawysokonapięciowej mikroskopii elektronowej i transmisyjnej mikroskopii elektronowej. Jesteśmy przekonani, że nasza metoda Golgiego-EM może stać się niezawodną i ważną metodą, która może przyczynić się do nowych odkryć w morfologii neuronów.

Zmodyfikowana i wysoce czuła metoda Golgiego-Coxa umożliwiająca całkowitą i stabilną impregnację neuronów embrionalnych

Zestaw FD Rapid GolgiStain Kit ( FD NeuroTechnologies, Inc., Ellicott City, MD) został opracowany przy użyciu ulepszonej metody impregnacji Golgi-Cox w celu zapewnienia stabilnego, czułego i wygodnego barwienia dojrzałych neuronów. Za pomocą tej metody nie można jednak wyraźnie zwizualizować neuronów embrionalnych. Jeszcze bardziej ulepszyliśmy metodę Golgiego-Coxa, wprowadzając dodatkowy etap wiązania aldehydem przed impregnacją; w ten sposób możemy stabilnie i wystarczająco zapłodnić neurony mózgu płodu, tak że widoczne są nawet delikatne gałęzie drzew dendrytycznych.

Barwienie dendrytów neuronalnych i kolców dendrytycznych metodą Golgiego-Coxa za pomocą zestawu FD Rapid GolgiStain .

Metoda Golgiego-Coxa jest jedną z najskuteczniejszych technik badania morfologii dendrytów neuronalnych i kolców dendrytycznych. Jednak niezawodność i czasochłonny proces barwienia Golgiego-Coxa były głównymi przeszkodami w powszechnym stosowaniu tej techniki. Aby przezwyciężyć te niedociągnięcia i promować tę nieocenioną technikę, opracowaliśmy zestaw FD Rapid GolgiStain Kit oparty na zasadzie metod opisanych przez Ramóna-Molinera w 1970 roku oraz Glasera i Van der Loosa w 1981 roku.

Zestaw znacząco poprawia i upraszcza technikę Golgiego-Coxa. Ten zestaw jest niezawodny do wizualizacji szczegółów morfologicznych neuronów, umożliwiając analizę różnych parametrów morfologii dendrytycznej, takich jak długość i wzór rozgałęzień dendrytycznych oraz liczba, kształt i rozmiar kolców dendrytycznych, zarówno w mózgach zwierząt, jak i po śmierci człowieka. Dostępny jest 40-minutowy film instruktażowy dotyczący zamrażania tkanek, kriosekcji i barwienia. © 2019 John Wiley & Sons, Inc.

FD Rapid GolgiStain Kit - Solution C — FD Rapid GolgiStain Kit – Solution C

Ocena charakterystyki diagnostycznej immunochromatograficznego zestawu szybkich testów diagnostycznych żółtej gorączki IgM firmy SD Biosensor w Ghanie

Żółta gorączka występuje w Ghanie endemicznie, a epidemie występują okresowo. Objawy zwiastunowe zakażenia wirusem żółtej febry (YFV) są niespecyficzne, co sprawia, że objawy kliniczne są niewiarygodne jako jedyne kryterium rozpoznania. Dokładne laboratoryjne potwierdzenie podejrzenia przypadków żółtej gorączki ma zatem kluczowe znaczenie w programach nadzoru. Raportowanie wyników testów ELISA IgM przez laboratoria może opóźnić się ze względu na późne przybycie próbek z miejsc pobierania, a także ograniczoną dostępność zestawów ELISA.

W tym badaniu oceniono charakterystykę diagnostyczną szybkiego immunochromatograficznego zestawu testowego Standard Q Yellow Fever IgM (biosensor SD) pod kątem szybkiej diagnozy zakażenia żółtą febrą w Ghanie. Panel 275 surowic, obejmujący 81 potwierdzonych YFV dodatnich i 194 ujemnych, został ponownie przetestowany w tym badaniu przy użyciu zestawu standardowego testu IgM na żółtą gorączkę Q.
Przy użyciu testu ELISA wychwytującego żółtą gorączkę CDC/WHO IgM jako punktu odniesienia, czułość, swoistość i dokładność standardowego zestawu testowego na żółtą gorączkę Q wyniosły odpowiednio 96,3%, 97,9% i 97,5%. Odsetek wyników fałszywie dodatnich wyniósł 5,1% i nie stwierdzono reaktywności krzyżowej, gdy test standardowego testu na żółtą gorączkę Q był testowany przeciwko próbkom dodatnim na dengę, malarię i wirusowe zapalenie wątroby typu B i C. Ponadto zmienność między czytelnikami i współczynnik nieważności wynosiły zero.
Wyniki wskazują, że wydajność diagnostyczna zestawu standardowego testu IgM na żółtą gorączkę Q w surowicy lub osoczu jest porównywalna z wykrywaniem IgM w surowicy za pomocą testu ELISA i może być używany jako szybki zestaw diagnostyczny w punkcie opieki do wykrywania infekcji YFV na obszarach endemicznych.

Porównawcza skuteczność diagnostyczna nowatorskiego zestawu do izotermicznej amplifikacji za pośrednictwem pętli odwróconej transkrypcji (RT-LAMP) do szybkiego wykrywania SARS-CoV-2

Chociaż łańcuchowa reakcja polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT-PCR) jest uważana za standardowy test w diagnostyce laboratoryjnej SARS-CoV-2, opisano kilka ograniczeń tej metody. Amplifikacja izotermiczna za pośrednictwem pętli odwrotnej transkrypcji (RT-LAMP) jest alternatywnym testem molekularnym i jest potencjalnie w stanie przezwyciężyć pewne wewnętrzne wady RT-PCR. W tym badaniu oceniliśmy wydajność diagnostyczną nowego testu HG COVID-19 RT-LAMP. W tej retrospektywnej analizie za pomocą testu HG COVID-19 RT-LAMP zbadano łącznie 400 rutynowo pobranych pozostałych próbek z nosogardzieli ze znanym wynikiem RT-PCR.

FD Rapid GolgiStain™ kit - Solution C
PK401-C	FD Neurotechnologies	250 ml	235.2 EUR
FD Rapid GolgiStain™ Kit (large)
PK401	FD Neurotechnologies	kit	979.2 EUR
FD Rapid GolgiStain Kit™ (small)
PK401A	FD Neurotechnologies	kit	751.2 EUR
FD Congo Red Solution™
PS108	FD Neurotechnologies	500 ml	284.4 EUR
FD Tissue Storage Solution™
PC103	FD Neurotechnologies	250 ml	177.6 EUR
FD Section Storage Solution™
PC101	FD Neurotechnologies	250 ml	157.2 EUR
FD Tissue Cryoprotection Solution™
PC102	FD Neurotechnologies	250 ml	156 EUR
FD Luxol Fast Blue Solution™
PS109	FD Neurotechnologies	500 ml	298.8 EUR
FD Thionin Solution™ (double strength)
PS101-2	FD Neurotechnologies	500 ml	219.6 EUR
FD Thionin Solution™ (regular strength)
PS101-1	FD Neurotechnologies	500 ml	206.4 EUR
FD Hematoxylin Solution™ (double strength)
PS104-2	FD Neurotechnologies	500 ml	310.8 EUR
FD Hematoxylin Solution™ (regular strength)
PS104-1	FD Neurotechnologies	500 ml	240 EUR
FD Eosin Y Solution™ (double strength)
PS103-2	FD Neurotechnologies	500 ml	232.8 EUR
FD Azure II Solution™ (double strength)
PS107-2	FD Neurotechnologies	500 ml	Ask for price
FD Eosin Y Solution™ (regular strength)
PS103-1	FD Neurotechnologies	500 ml	182.4 EUR
FD Azure II Solution™ (regular strength)
PS107-1	FD Neurotechnologies	500 ml	Ask for price
FD Neutral Red Solution™ (double strength)
PS106-2	FD Neurotechnologies	500 ml	273.6 EUR
FD Methyl Green Solution™ (double strength)
PS105-2	FD Neurotechnologies	500 ml	270 EUR
FD Neutral Red Solution™ (regular strength)
PS106-1	FD Neurotechnologies	500 ml	219.6 EUR
FD Cresyl Violet Solution™ (double strength)
PS102-2	FD Neurotechnologies	500 ml	278.4 EUR
FD Methyl Green Solution™ (regular strength)
PS105-1	FD Neurotechnologies	500 ml	216 EUR
FD Cresyl Violet Solution™ (regular strength)
PS102-1	FD Neurotechnologies	500 ml	223.2 EUR
FD Rapid TimmStain™ Kit
PK701	FD Neurotechnologies	kit	866.4 EUR
FD Rapid MultiStain™ Kit
PK501	FD Neurotechnologies	kit	721.2 EUR
Rapid decalcifier solution for histology
GE7112-1	Glentham Life Sciences	1	75.3 EUR
Rapid decalcifier solution for histology
GE7112-2500	Glentham Life Sciences	2500	150.7 EUR
Protein Stain-EZG Rapid Coomassie Blue Stain Solution
BSP041	Bio Basic	1KIT, 10prep	91.32 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-3E-B	Atom Scientific	3L Dispenser	36.52 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-D	Atom Scientific	500ml	10.8 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-E	Atom Scientific	1L	17.31 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-F	Atom Scientific	2.5L	32.27 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-G	Atom Scientific	5L	33.97 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution C
RRSP135-G-B	Atom Scientific	5L Dispenser	33.97 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-3E-B	Atom Scientific	3L Dispenser	37.37 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-D	Atom Scientific	500ml	10.8 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-E	Atom Scientific	1L	17.31 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-F	Atom Scientific	2.5L	32.27 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-G	Atom Scientific	5L	33.97 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution A
RRSP133-G-B	Atom Scientific	5L Dispenser	36.52 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-3E-B	Atom Scientific	3L Dispenser	36.52 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-D	Atom Scientific	500ml	10.8 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-E	Atom Scientific	1L	17.31 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-F	Atom Scientific	2.5L	32.27 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-G	Atom Scientific	5L	32.27 EUR
Rapi-Diff II Stain - Solution B
RRSP134-G-B	Atom Scientific	5L Dispenser	32.27 EUR
FD Apop™ Kit
PK101	FD Neurotechnologies	kit	854.4 EUR
FD NeuroApap™ Kit
PK201	FD Neurotechnologies	kit	987.6 EUR
Control Sections for FD NeuroSilver™ Kit
PCS101	FD Neurotechnologies	each	69.6 EUR
FD NeuroSilver™ Kit II (for 300 sections)
PK301	FD Neurotechnologies	kit	950.4 EUR
FD NeuroSilver™ Kit II (for 150 sections)
PK301A	FD Neurotechnologies	kit	789.6 EUR
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (frozen)
PCS102-	FD Neurotechnologies	each	87.6 EUR
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (frozen)
PCS102-2	FD Neurotechnologies	each	80.54 EUR
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (paraffin)
PCS102-1	FD Neurotechnologies	each	80.44 EUR
Sodium Pyruvate Solution, 100 mM Solution
CCM1753-100	Bio Basic	100 mL	73.01 EUR
STANDARD SOLUTION KIT
FTPF04886	Scientific Laboratory Supplies	EACH	171.03 EUR
Solution
S-2140-A	Scientific Laboratory Supplies	1ML	92.4 EUR
Gold Chloride Solution (0.2%)
GCB125	ScyTek Laboratories	125 ml	211.2 EUR
Gold Chloride Solution (0.2%)
GCB500	ScyTek Laboratories	500 ml	571.2 EUR
Gold Chloride Solution (0.2%)
GCB999	ScyTek Laboratories	1000 ml	1045.2 EUR
Gold Chloride Solution (0.1%)
GCS125	ScyTek Laboratories	125 ml	188.4 EUR
Gold Chloride Solution (0.1%)
GCS500	ScyTek Laboratories	500 ml	492 EUR
Gold Chloride Solution (0.1%)
GCS999	ScyTek Laboratories	1000 ml	750 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #1)
MPE01	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #2)
MPE02	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #3)
MPE03	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #4)
MPE04	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #5)
MPE05	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #6)
MPE06	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #7)
MPE07	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #8)
MPE08	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #9)
MPE09	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #10)
MPE10	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #11)
MPE11	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Membrane Protein Extraction Solution (Solution #12)
MPE12	ProFoldin	40 ml	167.04 EUR
Gentamicin Solution, Gentamicin Solution, 50 mg/mL
CCM1123-010	Bio Basic	10 mL	76.86 EUR
Protein Folding Solution Kit
PFS	ProFoldin	kit	121.74 EUR
SDS Solution
2102-100	Biovision	each	164.4 EUR
DTT Solution
R-1104	EpiGentek	131.34 EUR 48.40 EUR	1 ml, 500 mM 1 ml, 500 mM
TBE 10X Liquid Solution Ultra Pure Grade Solution
20-196	Genesee Scientific	4 Liters/Unit	400 EUR
EDTA Solution
2103-100	Biovision	each	164.4 EUR
Stop Solution
F006	Cygnus Technologies	12 ml	216 EUR
Plug Solution
GR103038	Genorise Scientific	500 mL	85 EUR
NEAA, Solution, 100X
CCM1668-100	Bio Basic	100 mL	73.01 EUR
DTPA Solution 0.005M
DTPA00051	Scientific Laboratory Supplies	1L	434.4 EUR
pH4.01 solution 500ml
PHB1402	Scientific Laboratory Supplies	EACH	38.4 EUR
pH7.01 solution 500ml
PHB1404	Scientific Laboratory Supplies	EACH	38.4 EUR
Perrhenic acid, solution (Hydroxotrioxorhenium(VII) solution)
GX3680-25	Glentham Life Sciences	25	392.6 EUR
Perrhenic acid, solution (Hydroxotrioxorhenium(VII) solution)
GX3680-5	Glentham Life Sciences	5	135.6 EUR
Borax Solution
BOR015	ScyTek Laboratories	15 ml	67.2 EUR
Borax Solution
BOR125	ScyTek Laboratories	125 ml	94.8 EUR
Borax Solution
BOR500	ScyTek Laboratories	500 ml	142.8 EUR
Borax Solution
BOR999	ScyTek Laboratories	1000 ml	219.6 EUR
TISAB Solution
TISAB1L-500ML	Scientific Laboratory Supplies	500ML	41.26 EUR
TISAB Solution
TISAB5	Scientific Laboratory Supplies	5L	235.2 EUR
Turks Solution
RRSP3605-D	Atom Scientific	500ml	7.92 EUR
Turks Solution
RRSP3605-E	Atom Scientific	1L	11.32 EUR
Turks Solution
RRSP3605-F	Atom Scientific	2.5L	15.9 EUR
Trypan Blue Trypan Blue Solution, 0.4% Solution in PBS.
TBL02-100ML	Caisson Labs	100 ml	98.4 EUR
Gold Chloride Solution 0.1% Aqueous
RRSP42-B	Atom Scientific	100ml	24.2 EUR
Gold Chloride Solution 0.1% Aqueous
RRSP42-C	Atom Scientific	250ml	60.06 EUR

Ogólne wartości czułości i swoistości HG COVID-19 RT-LAMP w porównaniu z RT-PCR wyniosły odpowiednio 97,0% (95% CI: 93,6-98,9%) i 98,5% (95% CI: 95,7-99,7%). Zgodność między testami była prawie idealna ( κ = 0,96). Zgodność była doskonała w próbkach o wysokim miana wirusa (próg cyklu < 30). Średni czas do pozytywnego wyniku na RT-LAMP wynosił 17 min. HG COVID-19 RT-LAMP to niezawodny zestaw do diagnostyki molekularnej do wykrywania SARS-CoV-2, a jego wydajność jest porównywalna z RT-PCR. Krótszy czas realizacji i możliwość wykonania diagnostyki molekularnej w warunkach point-of-care sprawiają, że jest to cenna opcja dla placówek bez zaawansowanego sprzętu laboratoryjnego.